3D技术和偏光技术的茜草鉴别分析
摘要
关键词
茜草;偏光技术、3D技术
正文
《诗经》是最早记载茜草的作品,茜草是传统常用药物。由于相同科植物相似,因此茜草容易被混淆[1]。部分报道显示,除了同属茜草科的17种植物,容易被混淆为茜草,另外有7种非同科植物,同样易被混淆。茜草科植物含有萘醌类化合物,抗氧化与止血效果良好[2]。现阶段研究茜草,主要研究其化学成分和药理作用等,很少研究茜草与混淆品的辨别方面内容,因此本次研究应用显微偏光技术,采用徒手切片法,鉴别茜草及其混淆品。
1一般资料和方法
1.1实验材料
本实验所用物品均由医院和诊所提供,如表1所示。
表1一般资料
编号 | 来源 | 鉴定结果 |
1 | 诊所1 | 茜草 |
2 | 医院1 | 茜草 |
3 | 诊所2 | 茜草 |
4 | 诊所3 | 掺伪地上茎 |
5 | 诊所4 | 茜草 |
6 | 医院2 | 茜草 |
7 | 医院3 | 大茜草 |
8 | 医院4 | 茜草 |
9 | 医院5 | 掺伪地上茎 |
10 | 医院6 | 掺伪地上茎 |
11 | 医院7 | 茜草 |
12 | 诊所5 | 茜草、大茜草 |
13 | 诊所6 | 茜草 |
14 | 医院8 | 茜草 |
15 | 诊所7 | 茜草 |
16 | 诊所8 | 掺伪地上茎 |
1.2实验仪器
包含数码成像系统、照相机、刀片、显微镜。
1.3实验方法
如表2、表3所示,为实验过程。
表2微形态鉴别
鉴别过程 | 方法 |
药材处理 | 清洗干净试验品表面的灰尘和杂质,做好准备工作 |
制备装片 | 用白色透明胶将需观察的部位固定在载玻片上 |
观察与拍摄 | 调整显微镜的倍数,将装片放置在显微镜下,调整景深,直到清晰为止,点击3D技术合成。 |
表3显微鉴别
鉴别过程 | 方法 |
软化处理 | 将所用样品放置在水中浸泡,在软化后方可捞出 |
取材 | 选择长度与粗细相同的药品,将多余的水分吸收掉,将一端切平。 |
徒手切片 | 左手将材料固定,右手拿刀片切材料,采用由左向右方向切。一次切下材料,不要反复切。 |
制作装片 | 材料切下后,使用温水从刀口上刷下,将材料放置在培养皿中。在载玻片上放置合适材料,用吸水纸吸收多余水分,添加水合氯醛,完成透化后,再加入一滴稀释甘油,盖玻片倾斜角度为45度,盖玻片盖上速度要缓慢,避免出现气泡,如果出现气泡,则需再次透化。 |
2结果
2.1鉴别性状及症状
本次研究显示,茜草露出的茎、蓬子莱Galium verum L、大茜草、茜草埋在地下部分的茎,上述四种是茜草主要的掺伪品。茜草下簇生很多根,根状茎主要为横生。茎数多条,在根状茎的节上发出。茜草的根及根茎与茜草露地面的茎和茜草的根存在明显差距,因此对其实施鉴别研究。
2.2显微鉴别
根茎横切木栓整齐排列,且根于根茎具有棕色物质,6—12列细胞。栓内层薄壁细胞有红棕色颗粒,没有明显形成层。草酸钙与根的长度保持平行,在韧皮部或者栓内层存在,还有部分草酸钙存在根茎髓部。木质部韧皮与木栓层的宽度之比为1:1。
生长在地下部分的茜草茎横切木栓呈现延长状态,排列比较整齐。栓内层薄壁细胞中存在红棕色颗粒。草酸钙针晶比较少,主要存在于栓内层和韧皮部位,呈现垂直或者平行排列状态。木栓层径、导管口径宽度之比为1:4.
大茜草根茎横切面木栓层为10—13列细胞,径向延长,形状如方形。栓内层为4列或5列细胞,含有较多草酸钙针晶束,与根长轴垂直,在韧皮部和栓内层存在,与长轴平行排列。木质部导管有黄棕色的分泌物,木栓层径向宽度、木质部和韧皮部之间的比为2:3:1。
蓬子菜Galium verum L,根茎栓层与根茎排列整齐,呈切向延长,有棕色物质。栓内层细胞的韧皮部较小,呈不规则长方形。草酸钙与根的长轴垂直排列,或者平行排列,草酸钙存在于韧皮部和栓内层,根茎髓部没有草酸钙针晶束。导管以环状排列方式。木栓层、木质部和韧皮部的宽度比为1:5:1。
3讨论
3D景深合成技术,属于新研究的一项技术,需应用显微镜自动合成。此技术应用在鉴别中药,可放大药物的细微特征,解决鉴别中存在的难题,为中药材提供微形态鉴别做依据[3]。在显微镜鉴别中,通常采用徒手切片法,此种方法具有快速和简单优势,但是对鉴别人员的操作技能有较高要求。偏光技术是指对检偏器进行应用,短时间内检验折射性物质,可直观观察显微特征。
采用上述技术鉴别茜草与茜草混淆品,通过观察断面、木质部导管密度等,可提高鉴别准确性。通过调研发现,亦有掺地上茎的现象。区分茜草与茜草茎露比较容易,但是茎埋在地下,而部分茎呈现红棕色,因此难以区。本次研究的关键是制作临时装片和徒手切片,这对后续观察结果产生直接影响,因此需要操作者有高超技术,需要完整切下组织切片,同时要保证准确的厚度。在研究阶段,发现蓬子莱、茜草根茎与大茜草横切面存较宽的次生射线,在木质部和韧皮部被贯穿,但是茜草根则未观察此种现象,这与生长环境存在关联。
综上所述,茜草资源比较匮乏,需深入研究茜草的药理活性和成分等,解决茜草分布不均匀情况。
参考文献
[1]郭利霄,申亚君,徐蕴杰,等.基于3D技术和偏光技术的茜草鉴别研究[J].世界科学技术-中医药现代化,2020,22(2):331-337.
[2]王珺,刘亚蓉,宋霞,等.基于多元统计分析对茜草与藏茜草特征图谱的研究[J].药物分析杂志,2022,42(11):2043-2049.
[3]阳奇.茜草醇提物制备工艺及其体外活性研究[D].哈尔滨商业大学,2022.
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