1.引言

动脉粥样硬化的核心病理特征包括动脉壁脂质蓄积、斑块形成、血管壁增厚硬化及管腔狭窄，是心肌梗死、缺血性脑卒中的共同病理基础[3]。

GPER作为新鉴定的雌激素功能性受体，在血管内皮细胞、平滑肌细胞及单核-巨噬细胞中广泛表达，可通过激活PI3K/Akt级联信号参与炎症调控和血管修复。已有证据表明，植物雌激素及丹参酮类衍生物能与GPER特异性结合，且GPER介导的PI3K/Akt/Nrf2信号轴与动脉粥样硬化病变程度显著相关。脱氢丹参酮IIA是丹参酮IIA的结构修饰衍生物，但其抗动脉粥样硬化活性及是否经由GPER调控尚未确证[4]。

本研究提出科学假说：脱氢丹参酮IIA通过调节GPER蛋白表达，抑制炎症信号级联，拮抗内皮细胞损伤。研究整合在体与离体实验[5]，运用多同位素成像质谱、分子生物学及免疫荧光技术，系统阐释其生物学效应和GPER介导的分子机制，为抗动脉粥样硬化创新药物研发提供依据。

2.材料与方法

2.1实验动物与细胞

选取8周龄雌性ApoE⁻/⁻小鼠288只，同品系C57BL/6J野生型小鼠48只，体质量18-20g，饲养于22±2℃、相对湿度55%、光照7:00-19:00环境[6]。

2.2动物分组与处理

小鼠适应性喂养1周后，ApoE⁻/⁻及部分C57BL/6J小鼠行双侧卵巢切除术，其余C57BL/6J小鼠行假手术。术后恢复1周，分为6组（n=48）：

表1 动物实验分组及给药情况

2.3血脂检测

禁食12h后眼球取血，3000rpm离心15min分离血清。胆固醇氧化酶法检测TC、TG，试剂盒测定LDL-C、HDL-C，分光光度计500nm处测定吸光度[7]。

2.4主动脉病理观察

PBS灌注后分离主动脉，4%多聚甲醛固定24h，脱水、石蜡包埋、切片，行HE染色与油红O染色。光学显微镜观察，Image-ProPlus6.0软件定量斑块面积。

2.5Westernblot

取主动脉组织30mg，RIPA裂解提取蛋白，Bradford法定量。SDS-PAGE电泳、转膜、5%脱脂牛奶封闭，一抗4℃过夜，TBST洗涤后二抗室温孵育，ECL发光显影，ImageJ分析蛋白相对表达量。

2.6RT-PCR实验

取50mg主动脉组织液氮研磨，TRIzol提取RNA，氯仿分离、异丙醇沉淀、75%乙醇洗涤，无RNA酶水溶解。紫外法测定浓度纯度，逆转录为cDNA，SYBRGreen实时荧光PCR，β-actin为内参。引物序列可查。

2.7免疫荧光

内皮细胞以1×10⁴个/孔接种于8孔腔室载玻片，贴壁后加入不同浓度脱氢丹参酮IIA、GPER激动剂G1或拮抗剂G15干预24h。4%多聚甲醛固定，0.01%Triton-X-100通透，山羊血清封闭，p-AKT、AKT一抗4℃过夜，荧光二抗与DAPI染液避光孵育，荧光显微镜观察拍照，统计荧光强度。

2.8统计学分析

计量资料以x̄±s表示，单因素方差分析比较多组数据，Tukey法两两比较，P<0.05为差异有统计学意义[8]。

3.结果

3.1对血脂的影响

与对照组相比，OVX组、HFD组及复合模型组TC、TG、LDL-C显著升高，HDL-C明显降低（P<0.01）。与模型组比较，脱氢丹参酮IIA低、高剂量组血脂紊乱改善，TC、TG、LDL-C随剂量递增逐步回落，HDL-C相应回升[8]。

3.2对主动脉斑块的影响

模型组主动脉广泛分布脂质斑块，血管壁结构破坏；给药组斑块负荷显著缩减，高剂量组改善更突出。多同位素成像质谱显示，给药组血管壁细胞异常增殖及脂质沉积均较模型组显著缓解。

3.3对PI3K、Akt表达的影响

模型组PI3K与Akt的mRNA及蛋白表达显著上调；脱氢丹参酮IIA干预后，上述分子表达随浓度升高呈渐进性下调。

4.讨论

动脉粥样硬化作为患病率居高不下的慢性心血管系统疾病，对人群健康构成重大威胁；现有化学合成药物在疗效与安全性方面尚存一定应用瓶颈，因此从天然来源发掘低毒性干预药物已成为当前研究的前沿热点。丹参作为传统中医学理论中活血化瘀类药物的代表性品种，其活性成分丹参酮ⅡA及结构衍生物脱氢丹参酮ⅡA均归属于类黄酮类植物雌激素范畴，在血管结构与功能保护方面展现出潜在应用价值[7]。

5.结论

脱氢丹参酮IIA显著改善动脉粥样硬化模型动物脂质代谢紊乱，缩减主动脉斑块形成；其机制为下调GPER蛋白表达，抑制PI3K/Akt信号异常激活，减轻内皮细胞损伤，延缓病程进展。该化合物在抗动脉粥样硬化创新药物研发中展现良好应用前景。

致谢

感谢西南医科大学临床医学院提供实验平台与设备支持，感谢指导老师在课题设计、实验实施过程中给予的专业指导。

参考文献

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[2]杨荣来，王凤荣。丹参及其制剂治疗冠心病的药理及机制研究新进展[J].中华中医药学刊，2024,42(11):156-160.

[3]黄弘博，史大卓，王培利，等。基于网络药理学与分子对接技术探讨黄连素-丹参酮IIA抗动脉粥样硬化的作用机制[J].中西医结合心脑血管病杂志，2024,22(22):4051-4057.

[4]姚宇迪，吴志婷，王炜，等。丹参酮ⅡA通过抑制HDAC3影响巨噬细胞极化的作用研究[J].中国动脉硬化杂志，2021,29(9):770-775.

[5]李志刚，胡大一。中西医结合防治冠心病稳定型心绞痛的研究进展[J].中国中西医结合杂志，2022,42(4):465-468.

[6]李文君，张维雅，陈家俊，等。丹参酮IIA磺酸钠对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响[J].中华医学杂志，2023,103(12):893-897.

[7]张雪，刘春娜，王艳.G蛋白耦联雌激素受体在心血管系统中作用的研究进展[J].中国老年学杂志，2023,43(15):3832-3836.

[8]熊美雪，刘婷，陈丽.GPER亚细胞定位动态调控与生物学功能研究进展[J].中国细胞生物学学报，2025,47(8):2126-2136.